概念:
MTT(噻唑藍)是一種具有細胞滲透性和正電荷的四唑染料,可以透過細胞膜被線粒體內的脫氫酶還原生成結晶狀的深紫色的甲臜產物,被適當的有機溶劑溶解之后可以在酶標儀上讀取吸光值。用于檢測細胞增殖/毒性。
Cell counting kit-8(CCK8)是屬于MTT的升級產品,可以被線粒體內的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產物。使用酶標儀在450nm波長處測定OD值,間接反映活細胞數量和細胞增殖狀況。
原理與方法:
在96孔板中接種調整好濃度的細胞懸液,在培養箱預培養24小時。根據實驗需要對培養板中的細胞進行不同干預處理,并培養一段時間。向每孔加入10 μL CCK-8溶液(注意避免引入氣泡影響OD值的讀數),在培養箱內孵育~1小時。用酶標儀測定在450 nm處的吸光度,計算細胞活率。
示例:
CCK8檢測
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