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概念：

穩轉株是指基于特定細胞系構建的持續過表達或干擾某特定基因的細胞系。用轉染或病毒侵染等方法將構建好的含靶基因的載體導入細胞，然后根據載體中所攜帶的抗性標志選用相應的方法進行陽性克隆篩選，得到可穩定表達目的蛋白或者穩定沉默特定基因的細胞株。常用的真核表達載體抗性標志有新霉素（neomycin）、潮霉素（hygromycin）和嘌呤霉素（puromycin）。此外還可以通過稀釋法或流式細胞術獲取單細胞克隆。

原理與方法：

查閱篩選藥物puro/G418/潮霉素等在目標細胞系中的使用劑量信息，設置濃度梯度進行預實驗確定目標細胞系的增殖速度和最適給藥條件。將目的基因導入細胞，于轉染/病毒侵染細胞48h后開始加藥處理，每天觀察細胞增殖狀態和培養基顏色，每3~5天換液一次。篩選1~2周后進行實驗驗證。